熒光定量PCR技術(shù)簡介

定量PCR簡介

    熒光定量PCR技術(shù)是普通PCR技術(shù)的改良和發(fā)展，它提高了普通PCR技術(shù)的特異性和準(zhǔn)確性，能做到實時監(jiān)控和準(zhǔn)確定量，廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、臨床檢驗、海關(guān)檢疫等各個領(lǐng)域。

 

定量PCR服務(wù)內(nèi)容

1、 合成

設(shè)計合成各種標(biāo)記探針并可根據(jù)客戶要求負(fù)責(zé)探針的調(diào)試（詳見合成）

2、 檢測

mRNA表達(dá)檢測及mRNA表達(dá)譜芯片后期驗證

MicroRNA檢測及MicroRNA表達(dá)譜芯片后期驗證

SNP檢測

基因copy數(shù)檢測

病原微生物樣品檢測

3、 研發(fā)

接受采用熒光定量PCR的檢測方法針對各種檢測目標(biāo)的合作研發(fā)和委托研發(fā)。

 

定量PCR實驗流程

PCR引物探針設(shè)計合成調(diào)試

標(biāo)準(zhǔn)品制作

樣本核酸抽提反轉(zhuǎn)錄

擴(kuò)增檢測

數(shù)據(jù)匯總初步分析

 

定量PCR檢測周期

常規(guī)檢測任務(wù)2－3周內(nèi)完成，具體情況根據(jù)要檢測的基因和樣本數(shù)而定。

 

定量PCR客戶提供

詳細(xì)的實驗要求，基因名稱等（詳見服務(wù)申請單），提供待測樣本，保證樣本質(zhì)量。

 

定量PCR送樣要求

細(xì)胞（≥10 5 個）                                                 

組織（≥100mg，黃豆大小）

全血（≥0.5ml）                                                     

基因組DNA（≥5ug）

 

報定量PCR告內(nèi)容

提供電泳圖片、熒光擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線、原始報告等。

 

定量PCR應(yīng)用領(lǐng)域

1、基礎(chǔ)研究

a 基因表達(dá)分析

研究目標(biāo)基因（mRNA和micrRNA）的表達(dá)狀況，準(zhǔn)確地進(jìn)行定量分析。

B 基因型分析

針對相應(yīng)的的等位基因或SNP位點，設(shè)計特異性的探針進(jìn)行擴(kuò)增檢測。

2、臨床病原微生物檢測（科研分析）

對臨床科研樣品中的細(xì)菌、病毒等病源微生物做定性定量分析。

對進(jìn)出口要檢疫的病源微生物、寄生蟲做定性定量分析。

 

電泳圖譜



標(biāo)準(zhǔn)曲線



擴(kuò)增曲線



溶解曲線