微衛(wèi)星（STR）檢測(cè)

STR檢測(cè)服務(wù)STR原理：

短串聯(lián)重復(fù)序列（short tandem repeat, STR），也稱(chēng)微衛(wèi)星 DNA（microsalite DNA） ，是由2 - 6個(gè)堿基對(duì)作為核心單位，串聯(lián)重復(fù)形成的一類(lèi)DNA序列，由于核心單位重復(fù)數(shù)目在個(gè)體間呈高度變異性并且數(shù)量豐富，構(gòu)成了STR基因座的遺傳多態(tài)性。它分布于人類(lèi)整個(gè)基因組，平均每15 kb就存在一個(gè)STR基因座。人類(lèi)基因組內(nèi)已發(fā)現(xiàn)了七千個(gè)以上的STR位點(diǎn)。它具有分布廣泛，易于檢測(cè)，信息量大，有高度多態(tài)性并遵循孟德?tīng)柟诧@性遺傳等優(yōu)點(diǎn)。是繼限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性 （RFLP） 之后的第二代遺傳記，目前STR分析已廣泛應(yīng)用于遺傳制圖、連鎖性分析、法醫(yī)學(xué)鑒定、疾病基因定位、物種多態(tài)性和遺傳病的診斷等諸多領(lǐng)域。

STR檢測(cè)服務(wù)流程：

1. 客戶提供

A.如果提供基因組DNA：至少提供100 ng DNA樣品（針對(duì)每個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)，需樣品3-5 ul，濃度為30 - 50 ng/ul）。

B.如果提供PCR產(chǎn)物：產(chǎn)物要通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)的電泳檢測(cè)，特異性要好。

C.如果需要設(shè)計(jì)引物，請(qǐng)?zhí)峁┠康钠涡蛄谢蛘呶⑿l(wèi)星檢測(cè)位點(diǎn)，引物設(shè)計(jì)好后需要客戶確認(rèn)。

D.除提供樣品類(lèi)型，DNA濃度和純度值外，還需要注明可能殘留的抑制劑成分。樣品溶解在ddH2O中，如果不是，請(qǐng)注明溶解液成分。

2. 確定STR位點(diǎn)，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，包括熒光標(biāo)記的選擇，引物的設(shè)計(jì)、合成和標(biāo)記，熒光分子量?jī)?nèi)標(biāo)的選用等。

3. 按照所設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案完成熒光PCR，利用瓊脂糖電泳檢測(cè)結(jié)果；若PCR產(chǎn)物特異性不夠，將進(jìn)行優(yōu)化。

4. PCR產(chǎn)物通過(guò)ABI 3730XL 測(cè)序儀器進(jìn)行毛細(xì)管電泳檢測(cè)，獲得擴(kuò)增片段大小的數(shù)據(jù)。

5. 用GeneScan 3.0/GenoTyper 2.0或GeneMapper 3.2等軟件對(duì)收集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，將產(chǎn)物片段大小、數(shù)量多少的信息轉(zhuǎn)化成直觀準(zhǔn)確的波形圖譜，為下一步進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析或連鎖分析等遺傳分析提供可靠的數(shù)據(jù)。

6.發(fā)送準(zhǔn)確的微衛(wèi)星（STR）分型結(jié)果報(bào)告及PCR產(chǎn)物。